Мои Конспекты
Главная | Обратная связь


Автомобили
Астрономия
Биология
География
Дом и сад
Другие языки
Другое
Информатика
История
Культура
Литература
Логика
Математика
Медицина
Металлургия
Механика
Образование
Охрана труда
Педагогика
Политика
Право
Психология
Религия
Риторика
Социология
Спорт
Строительство
Технология
Туризм
Физика
Философия
Финансы
Химия
Черчение
Экология
Экономика
Электроника

Хроматографические параметры



 

Рассмотрим основные хроматографические параметры, характеризующие поведение вещества в колонке.

Хроматограмма, являющаяся зависимостью сигнала прибора (ось ординат) от времени или объема подвижной фазы (ось абсцисс), представляет собой совокупность пиков разделяемых компонентов. Хроматограмма обычно состоит из базовой линии и пиков Обычно отдельный пик представляет собой гауссову кривую.

На рисунке 4 представлена идеализированная хроматограмма смеси двух веществ. По оси абсцисс отложено время хроматографирования (t), по оси ординат – величина сигнала детектора (I), зависящая от концентрации веществ в растворе (элюате), вытекающем из колонки.

 

Рисунок 4. Хроматограмма смеси двух веществ, полученная элюентным методом.

 

Время от момента ввода анализируемой пробы до регистрации максимума пика называют временем удерживания (элюирования) tR. Время удерживания складывается из двух составляющих – времени пребывания вещества в подвижной (tп.ф.) – и неподвижной (tн.ф.) фазах: tR = tп.ф. + tн.ф.. Величина tп.ф равна времени прохождения через колонку несорбируемого компонента (tп.ф.= t0). Время удерживания tR зависит от природы вещества и сорбента, а также упаковки сорбента и может меняться от колонки к колонке. Поэтому для характеристики "истинной" удерживающей способности следует ввести приведенное время удерживания tR/:

tR/ = tR – t0. (1)

Для характеристики удерживания часто используют понятие удерживаемого объема VR. Он равен объему подвижной фазы, который необходимо пропустить, чтобы элюировать вещество:

VR = tR·F, (2)

где F – объемная скорость потока элюента.

Vп.ф. (или V0) – "мертвый объем", объем для вымывания несорбируемого компонента. Он включает в себя объем колонки, незанятый сорбентом, объем коммуникаций от устройства ввода пробы до колонки и от колонки до детектора. Исправленный (приведенный) удерживаемый объем равен:

VR/ = VR – V0. (3)

При постоянных условиях хроматографирования (скорость потока элюента, состав фаз, давление, температура) значения tR и VR достаточно хорошо воспроизводимы и могут быть использованы для идентификации веществ.

Безразмерный числовой параметр k – фактор удерживания (коэффициента емкости) позволяет провести сравнение различных хроматографических систем. Этот параметр дает информацию о том, насколько дольше вещество находится в сорбенте, чем в подвижной фазе:

k = tR/ / t0. (4)

 

Вспомогательными параметрами, используемыми при количественной обработке хроматограмм, являются ширина пика на половине высоты (полуширина пика) ω0,5 или ширина пика в любой другой точке высоты, например, ширина в точке перегиба -2σ (рис. 5).

 

Рис. 5. К определению количественных параметров хроматографического пика. Выходная хроматографическая кривая (хроматограмма).

 

В количественном хроматографическом анализе измеряемыми величинами является площадь пика А – участок выходной хроматографической кривой, ограниченной контуром BCDEF (ветвями пика) и продолжением нулевой (базовой) линии BF. Кроме этого, высота пика h – отрезок GD, отвечающий максимальной амплитуде сигнала детектора (перпендикуляр, восстанавливаемый от продолжения базовой линии BF к вершине пика).

В хроматографическом анализе следует стремиться к получению хроматограмм с гауссовыми пиками. Сам факт асимметричности хроматографической полосы свидетельствует о нелинейной изотерме сорбции, что может служить причиной недостаточно полного разделения соседних зон и, как следствие, меньшей точности результатов количественного анализа.