Мои Конспекты
Главная | Обратная связь


Автомобили
Астрономия
Биология
География
Дом и сад
Другие языки
Другое
Информатика
История
Культура
Литература
Логика
Математика
Медицина
Металлургия
Механика
Образование
Охрана труда
Педагогика
Политика
Право
Психология
Религия
Риторика
Социология
Спорт
Строительство
Технология
Туризм
Физика
Философия
Финансы
Химия
Черчение
Экология
Экономика
Электроника

Ознакомьтесь с инструкцией определения токсигенных свойств возбудителя дифтерии. Определите токсинообразование возбудителя дифтерии по демонстрационному материалу.



Наказ МОЗ України 03.08. 1999 № 192

В основу метода определения токсигенности коринебактерий (in vitro) положено взаимодействие между токсином и антитоксином, которое происходит в плотной питательной среде в месте оптимального количественного соотношения токсина, продуцируемого коринебактериями дифтерии, который диффундирует в агар, и антитоксических антител, содержащихся в антитоксине. В участках агара, где токсин встречается с антитоксином, выпадает преципитат в виде белых линий, “стрел” или “усов” (Элек-тест, Elek-test).


Для постановки пробы на токсигенность необходимо иметь: питательную среду BDTM (среда с пониженным содержанием Fe2+), бумажные полоски, диагностический дифтерийный антитоксин или диски с антитоксином, контрольный токсигенный штамм Parks-Willams 8 (24‑48‑часовая культура).

При использовании бумажных полосок, “бляшки” исследуемой культуры высевают на расстоянии 0,7‑0,8 см одна от другой и на 0,5 см – от края полоски. Посев проводится “бляшками” по обеим сторонам полоски. На одну чашку высевают не более 10 “бляшек”, из них 6 “бляшек” исследуемой культуры, 4 – контрольного штамма. Чашки с посевом ставят в термостат.

Учет результатов проводят через 18‑24 и 48 часов. Критерием оценки специфичности преципитатов является слияние линий преципитации исследуемого штамма с линиями контрольного (токсигенного) штамма.

Исследуемые коринебактерии считаются нетоксигенными:

а) если линии преципитации у исследуемой культуры отсутствуют при наличии специфичных линий преципитации у контрольного штамма;

б) если линии преципитации размещены так, что их концы не могут слиться с концами специфичных линий контрольного штамма, а идут наперекрест с ними (неидентичны);

в) линии преципитации исследуемого штамма сливаются с неспецифическими линиями контрольного штамма;

г) линии преципитации исследуемого штамма перекрещиваются со специфическими линиями и сливаются с неспецифическими линиями контрольного штамма.

Нетоксигенные штаммы, выделенные от больных, направляются в Украинский центр госсанэпиднадзора для окончательного определения токсигенных свойств возбудителя дифтерии методом ПЦР.

_____________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________