На нефиксированный мазок наливают пипеткой готовый краситель — фиксатор Мая—Грюнвальда, представляющий собой раствор эозин-метиленового синего в метиленовом спирте, на 3 мин. Через 3 мин к покрывающей раствор краске добавляют равное количество дистиллированной воды и продолжают окрашивание еще 1 мин. После этого краску смывают и мазок высушивают на воздухе. Затем высушенный мазок докрашивают свежеприготовленным водным раствором краски Романовского в течение 8—15 мин.(=10 мин).
2.9.Лейкоцитарная формула
2.9.1 Методика подсчета лейкоцитарной формулы
Количество лейкоцитов в сосудистом русле зависит от выраженности процессов их образования, скорости их выхода (мобилизации) из костного мозга и перемещения в ткани (в особенности в очаги повреждения), от степени захвата легкими и селезенкой. В силу этих и других причин содержание лейкоцитов в крови здорового человека подвержено определенным колебаниям: оно повышается к концу дня, при физической нагрузке, эмоциональном напряжении, резкой смене температуры окружающей среды. Следует иметь в виду и возможность перераспределения лейкоцитов в кровяном русле за счет их пристеночного накопления в сосудах с замедленным кровотоком. Увеличение их содержания наступает после приема пищи (пищеварительный лейкоцитоз). Даже положение руки в момент взятия крови из пальца может повлиять на результаты анализа.
Самый многочисленный отряд лейкоцитов составляют гранулоциты, т.е. зернистые лейкоциты. Зернистыми они называются потому, что в их цитоплазме обнаруживается множество мелких зернышек. К зернистым лейкоцитам относят эозинофилы, т.е. лейкоциты, окрашивающиеся кислыми красителями (у здорового человека на их долю приходится (1 —5% от всего количества лейкоцитов), базофилы, окрашивающиеся основными красками (в норме их не более 1% от всего количества лейкоцитов), а также нейтрофилы, окрашивающиеся нейтральными красителями и составляющие большинство лейкоцитов. Последние различаются по степени своей зрелости и делятся на юные лейкоциты (0-1%), лейкоциты среднего возраста — палочкоядерные (1-6 %) и зрелые, или сегментоядерные, нейтрофилы (47—72%).
Эозинофилы и базофилы служат «транспортерами» важного биогенного амина — гистамина, избыток которого вызывает аллергические реакции, проявляющиеся, в частности, в виде крапивницы и бронхиальной астмы.
Другая разновидность лейкоцитов — агранулоциты, т.е. лейкоциты, лишенные мелких зернышек, гранул. К ним относятся моноциты, которые могут образовываться не только в костном мозге, но и в лимфатических узлах, элементах соединительной ткани. К агранулоцитам причисляют также лимфоциты, образующиеся преимущественно в лимфатических узлах. У практически здорового человека моноциты составляют 3—9%, лимфоциты — 19-37 от всего количества лейкоцитов.
При резкой активации кроветворения возможен выход я кровь незрелых лейкоцитарных клеток (вплоть до бластных).