В ходе транскрипции на ДНК-матрице синтезируется длинная молекула РНК (первичный транскрипт), содержащая последовательности экзонов и интронов. По завершении синтеза РНК- транскрипта последовательности интронов удаляются, что делает молекулу РНК значительно короче. Эта мРНК выходит из ядра в цитоплазму и соединяется с рибосомами. Молекула мРНК продвигается сквозь рибосому, и ее нуклеоидная последовательность транслируется в соответствующую последовательность аминокислот создаваемой белковой цепи.
РИБОНУКЛЕИНОВАЯ (Р Н К)
РНК –полинуклеотид, сходный по химическому составу с ДНК, но содержащий в нуклеотидах рибозу вместо дезоксирибозы и азотистое основание урацил ( U ) вместо тимина (Т).
Различают: 1.мРНК – матричная;
2.тРНК – транспортная;
3.рРНК- рибосомная.
Матричная (информационная) РНК (мРНК – матричная), состоит из сотен и тысяч нуклеотидов. мРНК переносит генетическую информацию из ядра в цитоплазму и непосредственно участвует в сборке молекулы полипептида на рибосрмах.
Транскрипция и процессинг
В ходе транкрипции РНК- полимераза II присоединяется к промотору – специфическому сайту молекулы ДНК, с которого начинается синтез полимера. РНК- полимераза II раскручивает участок двойной спирали ДНК, обнажая матрицу для комплементарного спаривания оснований. Когда РНК- полимераза встречает сигнал термиеации транскрипции,синтез полимера прекращается. Фактически на этом этапе с ДНК снята РНК – копия, но она еще не готова к участию в синтезе белка. Пока это только первичный транскрипт. В дальнейшем, он процессируется, в результате образуется мРНК, выходящая из ядра в цитоплазму.
Синтез полимеров рРНК и тРНК катализируют соответственно РНК- полимераза I и III.
Трансляция. Сборку полипептидной цепи инициирует стартовый кодон AUG, а терминирующие кодоны UAA, UAG и UGA ее прекращают.
Транспортная РНК (тРНК) содержит около 80 нуклеотидов и доставляет аминокислоты к рибосоме, где они присоединяются к растущей полипептидной цепи. Существует минимально одна тРНК для каждой из 20 аминокислот. Один конец тРНК (акцептор) присоединяется к аминокислоте, а другой конец содержит антикодон из трех нуклетидов, который узнает соответствующий кодон мРНК и спаривается с ним. Так тРНК переводит последовательность нуклеотидов в последовательность аминокислот.
Рибосомная РНК(рРНК) взаимодействует с иРНК и тРНК в ходе сборки полипептида, в комплексе с белками (в т. ч. ферментами) образуют рибосому.
Хроматин
Хроматин– комплекс ядерной ДНК с белками (гистоны, негистоновые белки).
Гетерохроматин(транкрипционно неактивный, конденсированный хроматин) интерфазного ядра. В СМ (видны в световой микроскоп)– базофильные глыбки, в ЭМ (видно в электронный микроскоп) – скопления плотных гранул. Располагается преимущественно по периферии ядра и вокруг ядрышек. Типичный пример гетерохроматина - тельце Барра.
Тельце Барра
Во всех соматических клетках генетически женского организма одна из Х –хромосом инактивирована и известна как половой хроматин (тельце Барра). Инактивация Х-хромосомы известна как лайонизация.
Лайонизация –механизм компенсации дозы генов Х-хромосомы у женщин объясняет гипотиза Мэри Лайон.
Согласно гипотезе, инактивация Х-хромосомы происходит в раннем эмриогенезе, осуществляеися случайным образом (инактивированной может быть либо отцовская, либо материнская Х-хромосома), затрагивает целиком всю Х-хромосому и характеризуется устойчивостью, передаваясь клеточным потомкам. Клетки женского организма по экспрессии генов Х-хромосомы мозаичны.
Эухроматин –транскрипционно активная и менее конденсированная часть хроматина, локализуется в более светлых участках ядра между гетерохроматином.
ХРОМОСОМА
Хромосомы видны при митозе или мейозе, когда хроматин конденсирован полностью.
ДНК
Рис. 8. Организация хроматина в хромосоме. Хроматин состоит из структурных единиц — нуклеосом, разделённых интервалами в 200 пар оснований. Во время митоза в результате плотной упаковки нуклеосом хроматин полностью конденсируется, формируя видимые хромосомы (из Widneil СС, Pfeninger КН, 1990)
ОРГАНИЗАЦИЯ ХРОМАТИНА В ХРОМОСОМЕ
Хроматин состоит из структурных единиц – нуклеосом, разделенных интервалами в 200 пар оснований. Во время митоза в результате плотной упаковки нуклеосом хроматин полностью конденсируется, формируя видимые хромосомы. (рис. 8)
Состав хромосом
Каждая хромосома содержит одну молекулу ДНК и ДНК- связывающие белки; хроматин в составе хромосомы образует многочисленные петли. Хромосома состоит из структурных единиц – нуклеосом. (рис. 9, 10)
Рис.9. Нуклеосома в неконденсированном хроматине содержит по две копии гистонов Н2А, Н2В, НЗ и Н4. Двойная спираль ДНК лежит на поверхности октамера гистонов и накручена на него. В конденсированном хроматине дополнительно присутствует гистон H1, соединяющий нуклеосомы [из Trifonov EN, 1981|
Нуклеосомы – сферические структуры диаметром 10 нм.
I
II
III
IV
V
Рис. 10. Уровни упаковки ДНК в хромосоме I – нуклеиновая нить, II – хроматиновая фибрилла, III – серия петельных доменов, IV – конденсированный хроматин в составе петельного домена, V – метафазная хромосома; 1 – гистон Н1, 2 – ДНК, 3 – прочие гистоны, 4 – микротрубочки ахроматинового веретена, 5 – кинетохор, 6 – центромера, 7 – хроматиды (по Б. Албертсу и соавт., с изменениями и дополнениями).
ГЕНОМ
Геном – полный комплект генов в хромосомах. Кариотип –описывает количество и структуру хромосом. Гаплоидный набор –23 хромосомы – характерен для гамет. Диплоидный набор- стандарт хромосом (23 х 2) – для соматических клеток.
ЯДЕРНАЯ ОБОЛОЧКА
Состав: 1. Наружная ядерная мембрана. На ее поверхности расположены рибосомы, где синтезируются белки, поступающие в перинуклеарные цистерны.
2. Внутренняя ядерная мембрана отделена от содержимого ядра ядерной пластинкой.
3.Перинуклеарные цистерны. Часть околоядерных цистерн связана с гранулярной эндоплазматической сетью.
4. Ядерная пластинка толщиной 80-300 нм участвует в организации ядерной оболочки и перинуклеарного хроматина, содержит белки промежуточных филаментов –ламины А, В и С.
5. Ядерные поры. Содержимое ядра сообщается с цитозолем через 3-4 тысячи специализированных коммуникаций – ядерных пор, осуществляющих транспорт (в т.ч. молекул РНК) между ядром и цитоплазмой. Ядерная пора имеет диаметр 80 нм, содержит канал поры и комплекс ядерной поры.(рис. 11)
Канал поры диаметром 9 нм беспрепятственно пропускает небольшие водорастворимые молекулы.
Комплекс ядерной поры содержит белок-рецептор, реагирующий на сигналы ядерного импорта (своего рода входной билет в ядро) – специальные последовательности из 4-8 аминокислотных остатков (например, в составе нуклеоплазмина или Т - Аг). Рецептор ядерной поры может увелтчивать диаметр канала поры и обеспечивать перенос в ядро больших макромолекул (например, ДНК- и РНК- полимеразы с М 100-200 кД).
Гранулы комплекса
ядерной поры
Рис. 11. Порыв оболочкеядра. Комплекс ядерной
Комплекс ядерной поры поры образован 8 большими белковыми гранулами, расположенными по окружности вблизи края поры и соединяющими обе ядерные мембраны (внутреннюю и наружную). Часто в центре поры присутствует большая центральная гранула. Она состоит из вновь синтезированной СЕ рибосомы, переносимой в цитоплазму [из SlevensA, Loewe J, 1992]
ЯДРЫШКО
Ядрышко – компактная структура в ядре интерфазных клеток. Основные функции ядрышка – синтез рРНК и образование субъединиц (СЕ) рибосом.
1.Транскрипция рРНК происходит в хромосомах 13, 14, 15, 21 и22. Петли ДНК этих хромосом, содержащие соответствующие гены, формируют ядрышковый организатор, получивший название в связи с тем, что восстановление ядрышка в фазу G клеточного цикла начинается с этой структуры.