ФА в крови

(часы)

выведение ФА

· Молекулярно-генетические методы (рекомбинантной ДНК). Метод позволяет обнаружить патологический ген в геноме.

1.Образцы ДНК пациента под действием рестриктаз разрезаются на бо­лее короткие фрагменты имеющие точки узнавания.

2.Полученные фрагменты разделяют электрофорезом в полиакриламидном геле на фракции, отличающиеся размером (молекулярной массой).

3.Получение необходимого числа копий определенных фракций ДНК при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР).

4.Тепловая денатурация размноженной фракции двухцепочечной ДНК на одноцепочечные фрагменты.

5.Помещение этих фрагментов в среду срадиоактивным зондом (одно- цепочечная ДНК, соответствующая патологическому гену). Если среди фрагментов ДНК имеется комплементарная зонду патологическая после­довательность, то происходит образование двухцепочечной ДНК.

6.Регистрация результата исследования происходит при помощи рентге- ночувствительной пленки.

· Методы экспресс-диагностики ("скрининг тесты", просеивающие

программы) - методы предварительной диагностики наследственных за-
болеваний.

1Дерматоглифический анализ - изучение гребешковой кожи. Применяется для диагностики врожденной компоненты наследственных заболеваний (при геномной
патологии отмечаются радиальные петли на 4 и 5 пальцах, ЧПБ, главный ладонный угол от 60° до 80° и др.) и для установления зиготности близнецов.

2. Химические методы (качественные цветные реакции). Для диагностики фенилкетонурии к мокрым пеленкам ребенка прикладывают бумагу, смоченную 10% раствором FeCI₃ (при наличие в моче ФПК – зеленоватое окрашивание).

3.Микробиологические тесты - основаны на свойствах бактерий нуждаться в определенных химических веществах для их нормальной жизнедеятельности.

Тест Гатри: кровь новорожденных, наносят на диски фильтровальной бумаги и помещают на агаровую среду, в которой находится штамм бактерий, рост которого подавлен антиметаболитом. Если концентрация ФА слишком велика, то отмечается бурный рост бактерий.

4.Биохимические: флюорометрические, хроматографические, ра-диоиммунологические экспресс-методы используют для быстрой предварительной диагностики наследственных болезней обмена.

5.Определение Х- и У- полового хроматина - исследуют клетки буккального эпителия или лейкоциты. Х-хроматин определяется при окрашивании ацеторсеином, а

Y- хроматин - акрихинипритом. Устанавливают генетический пол, диагностируют хромосомные ,болезни пола.

· Методы пренатальной диагностики (диагностика наследствен­ных дефектов плода на ранних стадиях беременности).

Непрямые методы (объект исследования - женщина): медико- генетическое, серологическое обследование и определение эмбрионспецифичных белков

(альфа- фетопротеин, хориональный гонадотропин) показаны всем беременным женщинам. Белки продуцируются клетками плода и пла­центы и поступают в кровь матери. Исследование проводится на 13-15 неде­лях беременности.

Уровень а-фетопротеина повышен :

а)при угрожающем выкидыше;

б)при внутриутробной гибели плода;

в)при Rh- несовместимости матери и плода;

г) при многоплодной беременности;

е) при дефектах нервной трубки;

ж) при врожденном нефрозе;

Низкий уровень альфа-фетопротеина отмечается при синдроме Дауна.

Прямые методы (объект исследования - плод):

1.Прямые неинвазивные методы показаны всем беременным женщинам, так как считаются безопасным для матери и плода.

Ультрасонография (УЗИ) - использование ультразвука для получения изображения плода и его оболочек. Метод применяется на 12-15 неделях беременности, позволяет выявить многоплодную беременность,грубые пороки развития нервной и опорнодвигательной системы.

2.Прямые инвазивные методы используются по показаниям, так как возможны осложнения (0,5-6 % случаев - выкидыш):

ü возраст старше 35 лет (риск синдрома Дауна повышен в десятки раз);

ü структурные перестройки хромосом у одного из родителей;

ü 1-й ребенок имеет болезнь с рецессивным типом наследования;

ü доминантно наследуемое заболевания у родителей;

ü при сцепленном с Х-хромосомой наследовании, если плод - мальчик;

ü беременность на фоне психологических травм, тяжелых заболеваний, неблагоприятного действия среды.

Хорионбиопсия (взятие эпителия ворсинок хориона) - проводится под кон­тролем УЗИ на 8-12 неделях беременности.

Хорион

Есть трансабдоминальный и трансцерви- кальный методы. Катетером с пластиче­ской канюлей, соединенной со шприцом, извлекают 10-25 мг ворсинок хориона.

Амниоцентез (взятие 20-30 мл амниотической жидкости с находящимися в ней клетками плода). Проводят на 15-17 неделе беременности трансабдоминально под контролем ультрасонографии.

Амниотическую жидкость исполь­зуют для биохимических исследований (генные мутации), а клетки хориона и пло­да - для цитогенетических исследований (хромосомные и геномные мутации). Методы позволяет диагностировать различные мутации в ранние сроки беременности.

Фетоскопияпроводится на 18-22 неделях беременности фиброоптиче- ским эндоскопом, вводимым под местным обезболиванием в полость ам­ниона через брюшную стенку матки.

Метод позволяет осмотреть плод, плаценту, пуповину и взять кровь пло­да из пуповины для диагностики наследственных болезней крови.

Недостаток метода - узкое поле зрения (ограничивает визуальную диаг­ностику патологии плода). В 5-10% возможен выкидыш.